皮肤病例中何时考虑细胞学检查如何操作请看

细胞学是研究细胞的学问。具体而言，它指的是利用显微镜检查皮肤表面、溃疡、皮屑、渗出物和耳垢等部位的采集样本的染色涂片，还包括深部组织的细针抽吸物。深部组织结构可能包括淋巴结，囊肿或内脏器官。

这些操作执行起来相对简单，并且在大多数情况下都是非侵入性或微创的。大部分可以在完全清醒的动物身上操作，风险小，没有持续伤害。动物情绪暴躁或当抽吸深部组织和内脏器官时可能需要镇静。器官组织的损害，传染性微生物污染和肿瘤传播等可能产生不良影响，但谨慎操作是可以有效避免这些情况。细胞学技术操作步骤是采集样本，干燥样本，固定细胞，染色并在显微镜下观察。

细胞学的判读可能比较困难，需要一些知识和经验。当然你并不需要对每一个病例都进行诊断。某些样本的分析，例如鉴别炎症和肿瘤病变是很有意义的。目前，许多兽医实验室都提供细胞学服务，包括染色，检查和分析固定样本。在向专业实验室送检前，自己制作保留一份细胞学涂片，自行检查并将自己的分析与实验室报告相比较是一种很好的学习方法。

临床医生获取样本、样本条件和检查技能不同，样本特异性和对结果的敏感性从低到高不等。重要的是要认识到，大多数细胞学技术只是采样很少比例的细胞样本，因此结果可能不具有代表性，因此也没有诊断性。与组织病理学不同，细胞学不会得到关于细胞组织结构或病变侵袭力的任何信息。因此，临床医生应该注意不要过度解释阴性检查结果。

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何时考虑细胞学？

细胞学是一种相对便宜的快速技术，可以快速得到结果，而且不需要昂贵和侵入性的操作方法，与不提医院相比具有很大竞争优势。细胞学对病例诊断可提供即时且非常有效的帮助，同时提高临床技术。几乎所有皮肤病病例中都应该把细胞学作为一个常规手段。

细胞学适用病例包括：

皮肤红斑区域；

丘疹和脓疱疹（图1）；

皮屑和结痂疾病；

皮肤油腻区域；

所有疑似肿瘤和其他结节；

淋巴结肿大；

丘疹和色斑；

水疱，大疱，脓疱，脓肿，囊肿和瘘道；

大面积且持久的溃疡（图2）；

非典型和/或罕见的病变；

病灶未按预期对治疗产生反应；

需要精确、快速的诊断——比如治疗费用昂贵，可能有严重副作用，甚至会考虑安乐死；

快速评估切除的病料。

图1、脓皮病患犬背部可见一个大脓疱。可以用小号注射器针头戳破脓疱，并载玻片抹擦几次表面以采集脓性分泌物。

图2、一例因跳蚤过敏性皮炎引起的嗜酸性肉芽肿猫咪的大块溃疡。这个病灶的病料采集可以通过用载玻片轻轻地按压患处表面。

换句话说，细胞学对大多数皮肤病病例都有作用。在许多情况下，细胞学都可得到诊断结果或非常有用：

马拉色菌耳炎或皮炎；

葡萄球菌耳炎或皮炎；

细菌过度生长综合征；

其他细菌感染；

皮肤真菌病；

深部真菌感染；

落叶天疱疮；

无菌性化脓肉芽肿综合征和组织细胞增多；

肿瘤，特别是要区分上皮细胞，间质细胞和圆形细胞等不同的肿瘤类型，和评估肿瘤恶性程度。一些圆形细胞肿瘤，如组织细胞瘤或者肥大细胞瘤，可通过细胞学鉴定（图3）。当然要确定肥大细胞瘤的肿瘤分期还需要组织病理学。提前预知肿瘤的类型，能够使临床医生更有效地制定手术方案。

图3、一个不起眼犬皮肤肿物的细针抽吸物的显微镜检照片。可见含有嗜酸性颗粒的大量肥大细胞。这些细胞表现细胞核大小不等和红细胞大小不等。

02

细胞学技术

样本采集有多种方法，其中一些方法更合适用于某些特定病灶和条件。这些方法包括：

胶带粘合法

直接压印涂片

间接压印涂片

耳部细胞学

针刺

细针抽吸

限于篇幅本文仅介绍前面两种方法

胶带粘合法细胞学

带粘合法用于去除角质层外层和附着微生物。有各种各样的胶带品牌可供选择，它们的粘性、透明度和Diff-Quik染料的浸渍能力也各有不同。常用的品牌包括Cellux和3MScotch，PressureSensitive和DiamondClear胶带。可能需要不断试验手头可用的胶带和染料，不是所有产品都互相匹配。

使用胶带条比载玻片稍微略长。

将胶带的中间部分反复在皮肤上按压，直至角质细胞和皮肤表面碎屑已明显粘在胶带上，直到胶带没有粘性（通常是六次）。可以使用单手或双手来握住和使用胶带，但是最重要的一点是手只抓住胶带的两头，在胶带中间施加足够压力从而充分地收集皮肤表面样本。

收集样品后，把胶带两端粘在载玻片的一面形成一个环，然后Diff-Quik染色。或者，将一滴紫色嗜碱性染色液放在载玻片上，然后把胶带粘在上面。

吸去多余的水或染料，然后在4倍或10倍显微镜下大体扫查，再使用40或油镜对可疑区域仔细观察。不需要盖玻片。

胶带粘合法适用于采集干燥、油腻、皮屑和溃烂的病灶样本，从而可以鉴别马拉色菌，细菌，炎性细胞或脱落的肿瘤细胞。它对于表面不规则或者一些采样不方便的部位尤为方便，比如脚趾间的皮肤。而对于湿润的病变，如脓疱，渗出物，糜烂或者溃疡灶的作用有限。因为这些病料往往不能粘附在胶带上。

直接印压涂片

这种方法对胶带粘不住的湿润或者脂溢性病变特别有用。直接印压涂片是把载玻片直接按压在病变部位。皮肤表面可能需要轻柔的清创，从而暴露有代表性的细胞。如果是需要清创的皮肤，你可以直接在原本皮肤表面按压涂片，也可以在结痂下面的皮肤按压，以确保采集到所有有价值的样本。在切除病灶的切割面也可以做直接印压涂片以快速鉴定疑似肿瘤或炎症病变。

如有必要用无菌针头戳破脓疱和丘疹。

把载玻片牢固的在病灶上按压一次。

避免在同一部位多次印压涂片，否则涂片会因太厚而无法正确染色和检查。

在相同的病变区域重复采样，每次用一个玻片按压，这样可以得到同一病灶的多种涂片，每一个涂片都应比上一个更深一些。

玻片风干然后Diff-quick染色或者使用其他染色剂。

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